FO4VN ─ Đội hình Chiến thuật FO4 ─ Tra cứu cầu thủ FO4: Tìm hiểu về Công việc và Đánh giá hiệu suất của các gen chuyên dụng để chuẩn hóa biểu hiện gen miARNs bằng phương pháp PCR đảo ngược-số học định lượng sử dụng mẫu vi nang cổ tử cung dựa trên nước

Video review vieira u6

Giới thiệu

Ung thư cổ tử cung (CC) là loại ung thư phổ biến thứ tư ở phụ nữ, với ước tính có 527.600 ca mới và 265.700 ca tử vong trên toàn thế giới (1). Ở các nước phát triển, tỷ lệ mắc và tỷ lệ tử vong đã giảm đáng kể trong thập kỷ qua. Tuy nhiên, gánh nặng từ việc mắc bệnh CC vẫn cao ở các nước đang phát triển và chưa phát triển do gặp khó khăn trong việc thực hiện các chương trình phòng ngừa và kiểm soát hiệu quả. Những khó khăn ở các nước đang phát triển bao gồm việc truy cập dịch vụ chăm sóc sức khỏe và thiếu điều kiện xét nghiệm tế bào, thường dùng phương pháp xét nghiệm Papanicolaou (Pap) với mức độ che phủ thấp (2). Để cải thiện việc sàng lọc CC, một số chương trình đã tập trung vào việc giới thiệu các bài kiểm tra phân tử tiên tiến như bài kiểm tra cấy phân tử HPV có thể cung cấp kết quả phát hiện tế bào tiền ung thư có độ nhạy và đặc hiệu cao hơn sau khi được xác nhận.

MiARNs (MicroRNAs) là những RNA không mã hóa nhỏ (từ 19 đến 24 nucleotides) tham gia vào việc điều chỉnh sau chuyển ngữ của biểu hiện gen (3), trong đó chúng đóng vai trò quan trọng trong một số quá trình tế bào như sự phân chia, tăng trưởng và tử tổn tế bào (4). Nhiều nghiên cứu đã báo cáo biểu hiện bất thường của miARNs trong ung thư (5), cho thấy những phân tử này có thể được sử dụng như các chỉ số tiềm năng cho khối u. Thực tế, một cuộc xem xét tổng quan gần đây đã xác định miARNs biểu hiện khác nhau trong các tổn thương tiền ung thư cổ tử cung và CC có thể liên quan đến tiến triển khối u (6). Tuy nhiên, phần lớn các phân tích biểu hiện miARNs trong CC đã sử dụng các mẫu mô u tế bào ung thư thu được từ các thủ thuật xâm lấn gây khó chịu cho bệnh nhân như biópsi mô cổ tử cung hoặc phẫu thuật (7). Việc phát triển xét nghiệm tế bào lỏng ít xâm lấn dựa trên biểu hiện miARNs (7) là một phương pháp mới để tìm kiếm các chỉ số không xâm lấn cho việc chẩn đoán sớm, theo dõi phản ứng với liệu pháp và tiến triển của khối u (7-9). Mẫu tế bào lỏng được xem là một phương pháp chính xác và triển vọng với giá thấp cho thực hành lâm sàng, nhưng việc tiêu chuẩn hóa phân tích biểu hiện miARNs vẫn là một thách thức lớn. Do đó, tiêu chuẩn hóa của phương pháp phát hiện này là cần thiết để sử dụng chỉ số biểu hiện miARNs có thể tái tạo được trong thực hành lâm sàng.

Xem thêm Wood Storks: Indicators of Wetland Health and the Need for Restoration

PCR đảo ngược-số học định lượng (RT-qPCR) là một kỹ thuật mạnh mẽ thường được sử dụng trong việc chẩn đoán nhiều khối u và bệnh nhiễm trùng do độ nhạy và đặc hiệu cao (9,10). Phân tích miARNs được coi là chỉ số tiềm năng quan trọng mới bởi miARNs có tính đặc hiệu và ổn định trong nhiều loại mẫu lâm sàng. Tuy nhiên, việc xác định các gen chuyên dụng có biểu hiện ổn định để chuẩn hóa phân tích biểu hiện miARNs là một bước quan trọng để có độ chính xác tốt hơn với kỹ thuật này. Việc sử dụng gen chuyên dụng như đối tượng điều chỉnh nội sinh là phương pháp phổ biến nhất để chuẩn hóa dữ liệu RT-qPCR cho biểu hiện miARNs (11). Gen chuyên dụng là các nhân tố điều khiển phản ứng trong cùng một tế bào được sử dụng để chuẩn hóa biểu hiện gen miARNs khác nhau và chúng có thể có các phiên bản khác nhau. Để một gen được coi là gen chuyên dụng đáng tin cậy, nó cần đáp ứng một số tiêu chí nghiêm ngặt về hiệu suất (12), chẳng hạn như độ biến đổi biểu hiện tối thiểu giữa các mô và trạng thái sinh lý của cơ thể. Hơn nữa, bộ điều khiển được sử dụng phải đo lường chính xác bất kỳ biến đổi kỹ thuật nào phát sinh từ sự khác biệt về số lượng hoặc chất lượng về vật liệu di truyền đang được kiểm tra (13). Quan trọng hơn hết, tiêu chí quan trọng nhất trong số những tiêu chí này là mẫu hình biểu hiện của gen điều chỉnh không can thiệp hoặc tạo ra những thay đổi giả trong các mẫu kiểm tra. Đáp ứng những điều kiện cơ bản này là các thuộc tính cơ bản của một gen chuyên dụng tốt cho việc chuẩn hóa biểu hiện biểu hiện miARNs từ các mẫu sinh học cụ thể quan tâm. Việc xác định các gen chuyên dụng phù hợp là một bước quan trọng để thu được kết quả tái lặp được khi nghiên cứu biểu hiện miARNs khác nhau. Việc sử dụng các gen kiểm soát không đáng tin cậy có thể dẫn đến ước lượng sai về mức biểu hiện của miARNs quan tâm (14,15). Vì lý do này, việc chọn lựa các gen chuyên dụng phù hợp để chuẩn hóa biểu hiện miARNs trong việc sử dụng LBC là một vấn đề quan trọng cần được giải quyết. Không có gen chuyên dụng nào là duy nhất và biểu hiện ổn định trong tất cả các loại mẫu, cũng như trong các loại bệnh khác nhau trong tất cả các thiết kế thực nghiệm, điều này cho thấy tính ổn định của biểu hiện gen chuyên dụng cần được kiểm tra một cách nghiêm ngặt (16,17).

Xem thêm Top những thanh kiếm mạnh nhất trong One Piece

Đây là nghiên cứu đầu tiên để đánh giá các gen chuyên dụng điều khiển biểu hiện miARNs cho chuẩn hóa dữ liệu RT-qPCR trên các mẫu LBC cổ tử cung. Vì chưa có sự thống nhất nào về lựa chọn tốt nhất cho các điều chỉnh, chúng tôi đã tiến hành một cuộc xem xét thông qua tìm hiểu về các gen chuyên dụng được sử dụng phổ biến nhất trong chuẩn hóa dữ liệu RT-qPCR cho biểu hiện gen miARNs. Bên cạnh đó, chúng tôi đã đánh giá mức độ biểu hiện tương đối của chúng trong các mẫu LBC từ các bệnh nhân đã tham gia sàng lọc ung thư cổ tử cung thường xuyên.

(Bản dịch một phần từ bài viết gốc đã được điều chỉnh để phù hợp với FO4VN – Đội hình Chiến thuật FO4 – Tra cứu cầu thủ FO4)